以下是ELISA樣本分裝避免反復凍融的規范操作指南,結合不同樣本類型和保存條件進行說明:
一、分裝基本原則?
單次用量分裝?
根據實驗需求預估單次用量(如50-100μL/管),分裝至無菌EP管或凍存管中?。
推薦使用帶螺旋蓋的凍存管(如1.5mL/2mL規格),避免密封不嚴導致樣本蒸發或污染?。
標記規范?
標注樣本編號、日期、濃度(如適用)及凍融次數(初始標記為0次)?。
二、分裝操作步驟?
血清/血漿樣本?
離心后立即分裝,避免長時間室溫放置導致蛋白降解?。
使用預冷凍存管(冰上操作),分裝后快速密封?。
細胞上清/裂解液?
離心去除雜質后,按200-500μL/管分裝(避免過滿導致凍裂)?。
組織勻漿液?
按1:9比例稀釋后分裝,建議每管≤1mL(減少凍融體積波動影響)?。
三、凍存與解凍要點?
凍存條件?
短期保存?:-20℃(≤1個月)?
長期保存?:-80℃(≤6個月)或液氮(>6個月)?
解凍方法?
15-25℃水浴快速融化(避免冰晶破壞蛋白結構)?
解凍后立即使用,未用完部分丟棄(禁止二次凍存)?
四、特殊注意事項?
避免氣泡?:分裝時槍頭貼壁緩慢加樣,減少氣泡產生?。
凍存管選擇?:優先使用無DNase/RNase的凍存管(尤其用于核酸相關檢測)?。
凍融記錄?:每次凍融后更新標記,建議凍融次數≤3次?。
通過規范分裝和凍存流程,可最大限度保持樣本穩定性,確保ELISA檢測結果的可靠性。
注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。 Elisa試劑盒
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