有哪些方法可以避免ELISA樣本的交叉污染?
在ELISA實驗中避免樣本交叉污染需采取以下關鍵措施:
1. 專用耗材與工具
使用一次性槍頭(每份樣本更換)和移液器,避免液體殘留導致混樣。
推薦帶過濾芯的槍頭,可進一步防止移液器污染。
2. 操作流程控制
順序優化:優先處理低濃度樣本,再處理高濃度樣本,減少高濃度樣本殘留風險。
分區操作:劃分加樣區、洗滌區、檢測區,避免試劑或樣本濺出污染。
3. 樣本處理規范
樣本分裝后單次凍融,避免反復凍融導致蛋白降解或污染。
稀釋樣本時確保充分混勻,避免局部濃度差異影響結果。
4. 環境與設備管理
實驗臺面定期用75%乙醇消毒,離心機及時清理殘留液體。
移液器定期校準,確保加樣精度(尤其是<1μL時誤差率需控制)。
5. 洗滌與孵育優化
洗板機需檢查噴孔通暢,手工洗板時垂直拍板避免交叉污染。
溫育時間嚴格把控,避免非特異性結合增加背景信號。
通過上述措施可顯著降低交叉污染風險,確保ELISA檢測的準確性。
注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。
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