產品信息

產品描述

     miRNA鏈cDNA合成試劑盒是采用莖環法原理的專用試劑盒， 5×Reaction Mix為一管式反轉錄預混液，含有反轉錄所需的所有試劑（反轉錄酶、RNase Inhibitor、dNTPs、Buffer），只需加入模板RNA和莖環引物即可進行反應，使得cDNA的合成更加的方便快捷。

     本試劑盒中使用了具有DNA分解活性的特殊gDNA Remover，不需要中途開蓋添加，只需一步操作，即可同時完成基因組清除與逆轉錄反應，大大的簡化了操作步驟，避免了繁雜的加樣過程對樣品造成的污染和RNA的降解。本試劑盒的反轉錄酶具有的熱穩定性，經過特別優化的緩沖體系，限度保證各種miRNA特異性逆轉錄產物的合成。同時產物cDNA的兼容性好，可以適配市面上主流的熒光定量mix做下游檢測試驗。

miRNA逆轉錄試劑盒(莖環法）

產品組分

運輸和保存方法

冰袋運輸。-20℃保存，有效期1年。

注意事項

1）盡量避免RNase對樣品的污染；

2）為保證逆轉錄的成功，請盡量獲得高質量的RNA樣品；

3）5×Reaction mix和gDNA Remover含有甘油，比較粘稠，溶液易掛壁和吸附在移液槍頭外導致產品損耗，因此，在使用前請點甩離心后使用，同時使用低吸附移液槍頭；

4）5×Reaction mix和gDNA Remover所包含的酶均足夠量。即使每次5×Reaction mix只用3.6μl或0.8μL的gDNA Remover都不會對使用效果造成影響。

5）本產品僅作科研用途！

使用方法

一、莖環法miRNA鏈cDNA合成(以20 μl反應體系為例，可使用10μL體系)

1.使用前將每種溶液輕彈或者輕微渦旋振蕩混勻，可簡短離心以收集殘留在管壁的液體到管底。

2.在無RNase管里面加入以下成分：(建議使用PCR管冰上配制，置PCR儀反應)

* 在反應中使用的total miRNA 必須包含有小分子RNA(miRNA)。此過程也可以使用富集的miRNA， 單miRNA無法直接用分光光度計定量，建議直接加入2μl ~5μl。可根據目的miRNA豐度決定加入量，但是對于低豐miRNA 樣品而言(如血清血漿提取物)，可直接加入體積8 μl。